食用菌母種製作方法
一、食用菌種瓶的選擇
用100毫升醫用鹽水瓶代替試管作盛裝培養基的容器。
二、培養基的配製
1.配方:馬鈴薯200克,葡萄糖20克,瓊脂18~20克,水1000毫升。
2.製作:馬鈴薯挖去芽眼,去皮洗淨,切成薄片後加水,在鋁鍋中煮沸25~30分鐘,用4層紗布過濾,取濾液放入鋁鍋中,加入瓊脂,小火加熱並不斷攪拌,待瓊脂溶化後加入葡萄糖,加開水補足1000毫升,攪勻,趁熱裝入鹽水瓶中,每瓶裝8~10毫升,塞上棉塞棉塞要求乾燥、鬆緊、長度合適,再用牛皮紙包住棉塞及瓶口部分,用膠圈紮緊瓶口。
三、滅菌
採用高壓滅菌,若沒有專用高壓鍋,可用家用高壓鍋進行滅菌。方法是:將裝好培養基的菌種瓶放置在高壓鍋中,瓶間留有空隙,不可堆放過緊,以利蒸汽循環,滅菌徹底。當壓力錶指針指到0.05時,打開放氣閥,集中排出冷空氣,使壓力降到零時,關閉排氣閥進行升壓滅菌,自動放氣後保持30分鐘家用普通高壓鍋滅菌1.5小時,讓其自然冷卻,取出放置在接種箱中備用。
四、菌種分離
主要採用組織分離法。通常是從食用菌子實體內部分離純菌種,操作時,從子實體內切取一小塊組織,放在培養基中培養可長出純菌種,且菌絲萌發快,遺傳性狀穩定,後代不易發生變異。
1.種菇消毒:種菇採下後,切去菌柄,放入洗淨的盤內,在裝有紫外燈的接種箱內照射20~30分鐘。
2.接種塊切取:在已消毒的接種箱內,撕開子實體,用經酒精燈火焰殺菌冷卻的小刀,在菌柄與菌蓋交接處內部切取黃豆大小組織塊,放入菌種瓶內培養基上培養。
3.接種塊選擇部位:接種塊選擇部位因食用菌種類不同而異,菇體肥厚的種菇,在菌蓋外緣菌蓋皮和菌褶交接處切取組織塊進行分離。
菌體小、蓋薄、柄空的菌類如金針菇,應快速擊掉菌蓋,用接種針鈎取菌柄頂端生長點組織進行分離。
菌肉極薄菌柄中空孢子不易萌發的傘菌類,可採用子實層分離法,選取半破膜的子實體,移入培養基上,菌絲萌發後即轉入新的培養基上。對子實體較大、質地結實的多孔菌類,應取子實體外緣菌肉組織塊。
含水量低的子實體切取5平方釐米的小塊,在酒精燈火焰上烘烤5~10秒鐘,使子實體表現微焦,然後用無菌刀切取菌肉組織一小塊,移入培養基上。
五、培養及管理
將放入組織塊的菌種瓶豎放在室內架上或平台上,室內温度控制在20~28℃,經過1~2天組織塊萌發。菌絲生長期間注意觀察。發現污染及時挑出,經過10天左右菌絲長滿瓶,母種製作成功。
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