靈芝母種製作技術
回答:使用馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml配製培養基,馬鈴薯去皮後切塊洗淨,加水1000毫升,文火煮沸30分鐘後過濾取汁,將瓊脂放入液體內文火煮沸,不斷攪拌至溶解,培養基煮好後趁熱分裝試管,塞上棉塞,包紮塑料薄膜,放入滅菌鍋,之後拿出斜放,冷卻後即凝固成斜面培養基。
一、準備用品與試劑
主要包括各種營養物質、高壓滅菌鍋、天平、棉塞、試管(20毫米×200毫米)、稀鹼液(1摩爾/升NaOH溶液,即4克氫氧化鈉溶於100毫升水)、稀酸液(1摩爾/升鹽酸溶液,即84毫升濃鹽酸加水916毫升)等。
二、培養基配方
1、馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml。
2、馬鈴薯100g、麩皮100克、蔗糖20g、KH2PO4 1g,MgSO4 0.5g、瓊脂20g、水1000ml。
3、馬鈴薯200g、蔗糖20g、KH2PO4 2g,MgSO4 0.5g、維生素B1 20毫克、瓊脂20g、水1000ml。
三、培養基配製
1、馬鈴薯等塊莖、植物根去皮後切塊洗淨,加水1000毫升,文火煮沸30分鐘後過濾取汁,其他各種成分稱量要準確,配製過程中葡萄糖要最後加入,靈芝一般要求PH5.5-6,用稀鹼1摩爾/升Na〇H、稀酸1摩爾/升HC1來調整酸鹼度至適度為止。將瓊脂(若為條形需剪短)放入所配液體內,文火煮沸,煮時不斷攪拌至溶解。
2、培養基煮好後趁熱分裝試管,裝量為試管長度的四方之一左右,然後塞上棉塞。傾倒時要防止培養基沾污管口,一旦沾上應用紗布擦淨。試管要事先洗淨,嚴防油污。棉塞用未脱脂普通棉花,大小、鬆緊適中,要求與管壁緊貼。
四、滅菌與培養
棉塞端包紮塑料薄膜,放入滅菌鍋,經高壓滅菌後,除去包紮的薄膜,直立於容器或框架內,使管內水蒸氣向外界散發,當温度下降至50℃左右時(取試管1支貼放臉上,很燙但能放得住,約為50℃左右),即可整捆斜放在斜面板上,斜面長度不超過管長的二分之一,冷卻後即凝固成斜面培養基。
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