菌種保藏的原理,菌種保藏方法
回答:1、菌種保藏的原理:菌種保藏有多種方法,其原理大多大同小異,主要是人為創造條件儘量降低生物體內的代謝活動,以達到延長生命、減少變異的目的,其中低温、乾燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素。2、菌種保藏方法:菌種保藏常用的方法有凍幹保藏法、液氮保藏法、甘油管冷凍保藏法、傳代培養保藏法、寄主保藏法、載體保藏法等。
一、菌種保藏的原理
1、菌種保藏的原理是根據菌種的生理生化特性,人為創造條件儘量降低生物體內的代謝活動,以達到延長生命、減少變異的目的。在保藏過程中,必須使微生物的代謝處於最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。
2、低温、乾燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,因此菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。其中低温可減緩機體細胞的酶活,降低新陳代謝,達到保藏菌種的目的,同時會導致菌體誘發菌絲自溶機制。
二、菌種保藏方法
常用的方法有凍幹保藏法、液氮保藏法、甘油管冷凍保藏法、傳代培養保藏法、寄主保藏法、載體保藏法等。
1、凍幹保藏法
凍幹保藏法是最有效的方法之一,具體為:先使微生物在極低温度(-70℃左右)下快速冷凍,然後在減壓下利用昇華現象除去水分(真空乾燥),其中真空冷凍乾燥法最常見。
2、液氮保藏法
液氮保藏法,又稱為超低温保藏法,主要利用微生物在低於-130°C的低温下新陳代謝趨於停止的原理,在液氮中(-196°C的超低温下)有效地進行菌種保藏的方法。該方法一般可保藏15年以上,是公認的菌種長期保藏技術之一。
3、甘油管冷凍保藏法
甘油管冷凍保藏法,利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達到保藏目的。該方法適用於一般細菌的保存,同時也適用於鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種,適用範圍廣,操作簡便,效果好,無變異現象發生。
4、傳代培養保藏法
傳代培養保藏法,又稱定期移植保藏法,包括斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等,是指將菌種接種於適宜的培養基中,最適條件下培養,待菌種生長完全後,通常置於4℃-6℃進行保存並間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。
5、寄主保藏法
寄主保藏法相當於一般微生物的傳代培養保藏法,必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代,尚不能用於在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等。
6、載體保藏法
載體保藏法,將微生物吸附在適當的載體如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而後進行乾燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
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