甘油菌種怎麼復甦，甘油菌種保藏具體步驟

1、將無菌操作枱滅菌30min，並用75%酒精棉球消毒包括手在內的所有物品。

2、用滅菌接種環扣取試管中的冷凍菌塊，然後放入3mlLB液體培養基上，最後在37℃150rpm過夜培養。

3、將過夜菌液重新按照上一個步驟活化一次，一般經2次活化的菌液即可用於實驗。這個過程操作一定要快，應提前準備好所有的物品後，再去冰箱取出保種菌。

一、甘油菌種怎麼復甦

1、對無菌操作枱滅菌30min，然後用75%酒精棉球消毒包括手在內的所有物品。

2、使用滅菌接種環扣取試管中的冷凍菌塊放入3mlLB液體培養基上，操作應適當快一些，以減少凍存管內的融化，然後在37℃150rpm過夜培養。

3、將過夜菌液重新按照步驟2活化一次，經過2次活化的菌液即可用於實驗。這個過程應準備好所有的東西后，再去冰箱取出保種菌，時間太久會導致保種菌死亡。

二、甘油菌種保藏具體步驟

甘油菌種保藏大多采用-80℃（-70℃）冰箱保藏，具體操作步驟如下：

1、甘油原液太粘稠，應配製合適的甘油水溶液，在無菌操作條件下，分別向已滅菌的2mL凍存管中，加入500uL菌液和500uL50%甘油溶液，充分混勻後，分裝至提前滅菌好的保藏管中。

2、將甘油菌放入-80℃（-70℃）冰箱保藏，注意“慢凍快化”，冷凍時降温速率保持1℃/min，保藏時間一般為2-4年左右。有時為了減少菌體因冰晶形成造成的死亡，也會使用液氮速凍之後在放到-80℃冰箱保存。