靈芝菌種如何採用礦油封藏法？

什麼是靈芝菌種礦油封藏法

礦油也稱為液體石蠟，故也稱為液體石錯保藏法。是將滅菌的液體石蠟注入到待保藏的靈芝菌種斜面上，使菌種與外界空氣隔絕。其作用是隔絕氧氣交流、防止培養基水分蒸發、降低微生物的新陳代謝活動、推遲菌種老化，達到延長培養物的生命，從而延長保存時間的目的。

靈芝菌種礦油封藏操作方法

1、礦油的滅菌：將液體石錯裝入三角瓶中（裝至瓶體積的1/3)，塞好棉塞，同時準備一套裝有虹吸管的與三角瓶配套的橡皮塞，用紙包紮好，一起放置到高壓滅菌鍋中消毒，在1.1千克/釐米2壓力下滅菌30分鐘。然後將裝有石蠟的三角瓶置於40℃温箱中，放置10天左右，使液體石蠟中的水分蒸發乾淨，備用。

2、接種培養：將需要保藏的靈芝菌種，接入到適宜的斜面培養基上，接種後，放置到最適宜温度下培養，待斜面長滿健壯菌絲後，即可取出注蠟。

3、灌注石蠟：在無菌室內，將無菌的帶有虹吸管的橡皮塞裝到液體石蠟的三角瓶上，然後用虹吸管將液體石蠟注入到斜面培養基內，以液麪高出斜面培養基頂部1釐米為宜。

4、封閉棉塞保藏：將灌注好液體石蠟的試管加棉塞，外包塑料薄膜或將試管口外多餘的棉塞剪去，用石蠟塗於棉塞頂部及管口的四周，然後再用牛皮紙包紮試管。也可用無菌的橡皮塞代替棉塞。將試管置於冰箱或室內陰涼乾燥處保藏。要定期檢查，發現培養基露出液麪必須及時補加無菌液體石蠟。

5、恢復培養：恢復培養時不必倒去石蠟，用接種工具從斜面挑取菌絲塊，儘量滴盡附帶的石蠟，移植到新的培養基上，必須經過兩次轉接，才能獲得正常生長的菌絲。液體石蠟易燃，使用時要注意防火。移接時，接種工具儘量少帶蠟，避免因蠟在火焰滅菌時，爆炸飛濺。