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如何生產銀耳菌種?

科普2.16W

(一)母種及原種把分離提純後的銀耳菌絲和香灰菌絲單獨分開培養於試管中。生產母種時,先取出銀耳菌絲,並擴大到所需要的管數。然後放在25℃培養到銀耳菌落直徑約lcm左右。此時,再在每支長了銀耳菌絲的試管中,接種極少量香灰菌絲,待兩者長在一起時,就可以出售或用於原種生產了。

如何生產銀耳菌種?

如先接香灰菌絲,因香灰菌絲生長快,很快覆蓋斜面,並很快消耗養料,其後接上的銀耳菌絲就不易生長。

若香灰菌絲和銀耳菌絲同時接種在一支試管中,同樣會出現銀耳菌絲少、香灰菌絲數量多的缺陷。

因此,生產銀耳母種(試管種)時一定要注意接種的先後,以及注意控制兩者的比例。

(二)銀耳及其“伴生菌”在可以人工種植的食藥用中,屬於這種類型的菌目前僅有銀耳和金耳。它們子實體的形成,銀耳除了要有純銀耳菌絲外,還必須有“伴生菌”即香灰菌的幫助;金耳除了要有純金耳菌絲外,還必須有粗毛硬革菌的幫助,兩者缺一不可。在一般條件下,銀耳和金耳的純菌絲體生長相當緩慢,分解木質素、纖維素能力極弱,分別要依賴於香灰菌絲和粗毛硬革菌絲分解基質,提供它們生長髮育所需的養分,否則便不可能形成子實體。所以在擴繁銀耳、金耳母種時,必須將兩種相應的菌絲體,移接在同一培養基上進行混合培養。現以銀耳為實例介紹兩種菌絲混合制種技術:

1、斜面母種混接法

取純銀耳菌絲試管母種和新配製的pda斜面試管各一支,連同接種器具一起放入接種室(箱)中,按無菌操作進行轉接,即挑取米粒大小、帶培養基菌種一塊,移接於空白試管斜面培養基上,加棉塞後置22-24℃下恆温培養6-8天。當銀耳菌絲長至似繡球狀如黃豆大小時,再連同香灰母種一起移入接種室(箱)裏,按無菌操作用接種鏟在距銀耳純菌絲團約2釐米處,接入一小塊香灰菌絲母種,培養2天在接種塊上便可見到白色菌絲,7天左右即形成白毛團而覆蓋銀耳純菌絲團,12-15天在白毛團的上方可見到有紅、黃色水珠即為成功。

需要指出,用銀耳與香灰菌的斜面混合母種擴接原種時,應切去斜面的前後端,只取其繡球狀的銀耳純白菌絲及附近黑灰色的香灰菌絲用於轉接。因此1支斜面母種只能接1瓶原種。

2、瓶裝木屑原種混接法

如果沒有銀耳純菌絲,將銀耳孢子培養出芽孢母種,再接入瓶裝木屑培養基製成的香灰菌母種,混合培養而成。

根據接種需要量,按1支香灰斜面母種擴接12-15瓶木屑培養基的比例,將香灰菌母種試管和經滅菌的瓶裝木屑培養基,以及接種用的器具,一起放入接種箱裏,按無菌操作,用接種鏟挑取黃豆大小的香灰菌母種一塊,接入木屑培養基瓶中。接種完畢,移至24-26℃下培養,約經2天即可見到接種塊上萌發白色菌絲。此後要隔天檢查,發現雜菌及時檢出剔除。一般培養11天左右,香灰菌絲可向培養基內延伸約3釐米,此時可觀察到培養基表面有灰褐色或黑褐色的分泌物,這表明香灰菌絲生長旺盛,應及時接入銀耳芽孢母種。

按1:12-15的比例,取銀耳芽孢母種試管和培養好的木屑培養基香灰菌母種;一起放入接種室(箱)中,按無菌操作,用無菌接種刀劃破香灰菌絲表層,再用無菌接種鏟挑取少量銀耳芽孢,接入香灰菌絲體中。混合後將瓶移至23-25℃下培養,經10天左右即可見到銀耳芽孢接種處生長濃白色菌絲。再培養18天左右即出現紅、黃色水珠,25天左右便可觀察到有扭結狀子實體原基,説明培養成功。1瓶這樣的木屑混合種可擴接30-40瓶原種(二級種)。

(三)種植種的生產根據原種生長的好壞,耳基大小,銀耳菌絲“吃料”的深度,來決定每瓶原種應擴接的瓶數。為了保證質量,儘量控制在40-60瓶之內。如果原種能攪拌得很均勻,使銀耳菌絲和香灰菌絲混合得很均勻,每瓶原種也可能接100-200瓶種植種。

(四)注意事項要生產出優良的銀耳菌種,除了注意上述的各項要求,如無菌操作之外,還必須注意如下幾個方面:

1.生物專一性銀耳菌絲和香灰菌絲配合也有專一性。因此,為了生產有效的銀耳菌種,我們必須從同一塊耳木上分別獲得銀耳的純培養(包括酵母狀分生孢子或銀耳菌絲)和純的香灰菌絲。不同地區或同一地區不同耳木(樹種)上得來的銀耳菌絲和香灰菌絲不能隨便調換,隨意組合。否則,就有造成衰敗的可能性。經調換和組合的效果,必須根據銀耳菌絲在木屑培養基中定植的情況,以及耳基形成的大小,開片的情況來判斷。凡是銀耳菌絲能繼續生長,形成耳基和順利開片的,便可以繼續擴大並用於生產,否則就不能使用。

2.接種比例:根據銀耳菌絲生長較慢,香灰菌絲生長很快這一個特點,在純的混合培養時,必須注意銀耳菌絲和香灰菌絲的接種比例。為了達到控制兩者的接種比例,採用先培養銀耳菌絲,後配香灰菌絲的辦法,最為理想。如果説銀耳菌絲的接種比例應達到1000:1也不算過份的(銀耳菌絲髮展到直徑約1cm,其內有成千上萬條菌絲,只要配上幾條香灰菌絲就可以了)。否則,銀耳菌絲很少,香灰菌絲佔絕對優勢,將來就不會出耳或出耳率很低。若採用在香灰菌絲中加人酵母狀分生孢子的方法來生產菌種的話,那麼銀耳酵母狀分生孢子的數量是很大的,每毫升培養液中銀耳酵母狀分生孢子的個數可達10億-100億個。在香灰菌絲生長的木屑培養基中加入酵母狀分生孢子液,因酵母狀分生孢子分散在木屑顆粒中不集中,而且不是所有的酵母狀分生孢子都能萌發成菌絲。因此,用此法生產銀耳菌種,效果不很理想,若得不到銀耳菌絲,可以把銀耳酵母狀分生孢子集中地塗在長了香灰菌絲的木屑培養基表面,這樣銀耳酵母狀分生孢子比較容易萌發。

3.培養條件銀耳純菌種(酵母狀分生孢子或銀耳菌絲)的培養條件和銀耳原種、種植種(混合培養)的培養條件是有一些不同的。因此,必須注意混合培養的條件,使銀耳菌絲和香灰菌絲都能適應同一培養基,同一培養條件。例如將温度控制在20-28℃範圍之內(最好是23-25℃)。原種的含水量控制在65%,種植種的含水量控制在65%-70%之間。因為原種培養基稍幹,有利於銀耳菌絲的生長,不易產生酵母狀分生孢子,有利於擴大為種植種;而種植種稍濕一些,有利於酵母狀分生孢子的產生和繁殖,此孢子液滲入木屑培養基深處,和香灰菌絲均勻混合,可以彌補銀耳菌絲“吃料”不深只長在表層的缺陷,使出耳率更高,更穩定。

還必須根據每一瓶原種耳基生育的狀況,來確定該原種是否可以擴大為種植種,以及每瓶應擴大幾瓶種植種。凡是混合培養後,能使銀耳酵母狀分生孢子萌發,銀耳菌絲能繼續生長,形成耳基,耳基能不斷長大的組合,都是有實際應用價值的菌種。原種經嚴格挑選,凡耳基大,銀耳菌絲生長多(吃料深的),香灰菌絲粗壯有力,攪拌後擴接的瓶數就多。反之,就不應擴大為種植種。為了更加保險起見,每瓶以擴大40-60瓶為宜。總之,必須使每一瓶新接種的培養基都有銀耳菌絲和香灰菌絲,或酵母狀分生孢子和香灰菌絲。或者把原種攪拌之後,塞上棉花塞再培養3-5天,使攪斷的銀耳菌絲再生新的菌絲,這樣才能保證種植種的質量。

4.提純復壯防止菌種因長期使用,生活力降低,出現耳片發黃,不易開片,再生力差的毛病。根據生產的方式選用不同菌齡、不同生理成熟度的銀耳菌株。如段木種植時,應選菌齡小,成熟度低,銀耳氣生菌絲一白毛團旺盛,不易膠質化的菌株;瓶栽時,應選菌嶺大,成熟度高,白毛團小,容易膠質化並易開片的菌株。香灰菌絲應選爬壁力強,羽毛狀分枝長的,分解木材能力強的菌株作為段木種植的菌株,而代料種植時,香灰菌絲要稍“弱化”一些的菌株才好,否則滿瓶、滿袋都是香灰菌絲,有限的營養都被香灰菌絲消耗掉,銀耳反而長不大。

原種貯藏的時間太長,耳基很大,培養基的養料消耗過甚,菌種的生活力已衰退,應棄之不用。否則使用效果還不如適齡的種植種再擴大培養的菌種。

5.母種保存母種應貯藏在4-15℃的冰箱中。每1-3個月移植一次。原種若不馬上使用,也應保存在低温、乾燥的場所。種植種滿瓶後至45天之內就應儘早地種下去。

銀耳純菌種長期單獨保藏,所長的子實體有變黃的趨勢;而和“香灰”菌絲混合培養,並經過長期保藏,子實體較不易變黃。為了得到雪白的銀耳,菌種應從色澤潔白的銀耳(野生的或家生的)中進行採種。保種3年以上就應注意色澤的問題。

標籤:菌種