木耳雜交育種程序是什麼?
問:木耳雜交育種程序是什麼?
雜交育種的基本程序是:1.選擇親本:從大量野生或栽培菌株中選出雜交甲、乙親本。在無菌條件下對種耳子實體消毒後,收集孢子。
2.單孢分離:從不同親本子實體中分離出一定量的甲、乙單個擔孢子(單核菌絲)。
3.雜交配對:因黑木耳單核菌絲時間很短,擔孢子一旦萌發成單核菌絲,需立即讓不同親本的甲、乙單核菌絲以單×單方式儘快配對結合,形成雙核菌絲。否則單核菌絲斷裂成粉孢子後再進行雜交,就會發生有性和無性摻雜的現象。其雜交在直徑2釐米的大試管內進行。在每支試管斜面培養基上,接入雜交親本的單核菌絲各一塊,二者的距離為2.5釐米,在24℃條件下培養。當兩個單核菌絲體接觸後,挑取接觸後的菌絲用顯微鏡檢驗,如系雙核菌絲,即可挑取一小塊移接到新的斜面培養基上。
4.轉管繁殖:將可親和的雙核菌絲在試管內培養到3釐米左右,轉接入新的PSA試管斜面培養基上,置於23℃左右環境中培養。
5.鏡檢初篩:用顯微鏡檢驗,菌絲是否有鎖狀聯合,有鎖狀聯合的菌株保留^用,淘汰掉無鎖狀聯合的菌株。
6.二次復篩:把有鎖狀聯合的雙核菌絲接種在同一培養基平板上,根據是否形成拮抗線,把相似或相同的菌株分開類別,避免大量重複,挑選出各自不同並與親本拮抗的菌株。
7.菌株栽培:把挑選出的菌株進行栽培試驗,測定菌株的性狀,即第一次栽培篩選。經篩選後的菌株稱為F,代雜交菌株。根據實驗結果,把產量高、色澤好、菌柄長、耳片適中、背部威毛少的優良菌株篩選出來,進行組織分離,獲得F2代雜交菌株。
8.F2代菌株篩選:繼續對F2代菌株進行栽培試驗,選出優良菌株,即第二次栽培篩選。
9.穩定性考察:經第二次栽培篩選出來的雜交菌株,還需經較大面積的中間試驗,其中包括對不同區域、不同海拔、不同温度、不同氣候、不同培養基質等條件的栽培試驗,從而選出適應範圍廣、產量高、質量好、抗病力強的黑木耳優良雜交菌株。
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